一、仪器基本信息

仪器型号：ZEISS 880

生产厂家：蔡司

购置时间：2016-6

所属技术服务部：形态学实验技术服务部

放置位置：科技大楼204 共聚焦显微镜室

管理人员：缪丹 15605181877             孙友 15056859175

仪器应用：可清晰显示细胞内细胞器（如线粒体、内质网、高尔基体）的精细结构，以及细胞骨架（微管、微丝）的分布和动态变化。例如，通过荧光标记肌动蛋白，能实时观察细胞迁移过程中骨架的重组。利用荧光共振能量转移（FRET）技术，结合共聚焦成像，可研究蛋白质之间的相互作用（如信号通路中蛋白的结合与分离），或特定分子（如离子、核酸）在细胞内的时空分布。通过时间序列扫描，记录细胞分裂、胞吞胞吐、凋亡等动态过程，生成三维动态影像，揭示细胞活动的机制。

二、仪器操作流程

1、首次操作时务必在负责人的指导下进行。

2、共聚焦房间的空调设置温度为24℃、去湿，请勿擅自调节。

3、按1-11的顺序进行开机，其中7号不动，保持横的状态。

4、按user启动电脑，点击灰色ZEN图标启动软件。弹出界面点击start system。

5、点击Acqusition中smart setup，弹出框内点击Dye框中选所用染料（比如蓝色DAPI），选择中间的Best signal框，设定好后点击Apply确认。

6、点击Acqusition中Acqusition Mode的Frame size 选1024＊1024，Average选2。

7、点击FCS中Laser，如果Argon里458、488、514的指标显示是红色，则需等待预热至图标变灰色，方可操作。

8、在63倍的物镜上滴香柏油，将载玻片上盖玻片一面朝下放入载物台。

9、预热好后点击Locate里的DAPI，在物镜下寻找细胞，通过粗细焦螺旋和方向舵调节好焦距和视野位置。

10、找好后点击Acqusition→Channels 中只勾选一个Tracks，点击Live调节粗细焦螺旋调整清晰度→调节Laser中激光强度（一般70以内）→调节Gain值（一般800以内）→Stop→snap显示成功后Channels 中勾选两个Tracks点击Exposure，拍摄成功后点击右上角小框内save image保存图片。

11、点击蓝色ZEN图标，依次点击file→open→点击需转换图片位置→找到图片→export→export ctrl→出现蓝色工作条，选择需转换的文件格式→export to中选择需保存的位置，设定好后点击Apply即可。

12、拷数据只能用全新格式化后的U盘进行拷贝，防止损害仪器。

13、用完后点击FCS中Laser，将on改成off，关闭电脑。按启动时倒序依次关闭按钮，6号需放热5min后激光器风扇停止转动后放可关闭，7号保持不动。开关机必须在使用30min以上。

14、用无水酒精擦拭干净油镜，盖上防尘罩，写好仪器使用记录。

15、将房间卫生整顿好，垃圾带出实验室，负责人检查后方可离开。

三、仪器注意事项

1、需按“外设→主机→软件” 顺序启动：先开启显微镜主机、激光模块、载物台控制器等外设，待指示灯稳定后（通常 1-2 分钟），再启动电脑及 Zen 成像软件。

2、关机时反向操作：先通过软件关闭激光光闸，退出程序，再依次关闭外设电源，避免瞬间电流冲击损坏激光发射器或光学元件。

3、切换激光波长时，需通过软件“Laser” 面板操作，禁止直接插拔激光模块线缆；紧急情况下，可按下主机面板的红色 “Emergency Stop” 按钮切断所有激光输出。