一、仪器基本信息

仪器型号：Octet RED96e

生产厂家：赛多利斯

购置时间：202502

所属技术服务部：细胞与分子平台

放置位置：科技大楼204

管理人员：童伟 18771036551

仪器应用：Octet RED96e 是基于生物膜干涉技术（BLI）的高通量分析系统，专为免标记实时检测生物分子相互作用设计。该系统在药物研发中实现高通量筛选（32分钟完成96样检测），可精准测定小分子/抗体与靶标的结合动力学（KD低至pM级），加速抗体优化（如新冠中和抗体开发）；在生物制品质控中直接定量复杂基质（血清、细胞裂解液）的蛋白浓度（0.05–2000 μg/mL），并评估抗体-Fc受体亲和力（CV<3.3%），符合GMP/GLP规范。其技术优势包括免样品纯化（兼容含DMSO/高粘度样本）、8通道并行分析（传感器可再生）及21 CFR Part 11认证软件，已广泛应用于药物发现、抗体药效评价及质量控制领域，显著提升研发效率。

二、仪器操作流程

Octet RED96e 分子互作仪器简易操作程序

1、实验准备

样品板，greiner PN655209,200ul 一孔加入缓冲液，固化样品，结合样品，再生缓冲液等

预湿板，greinier PN655209,200ul 一孔加入固化缓冲液

将预湿板放到蓝色的底盘中(A1 位置卡住)，然后将传感器放到预湿孔相应的位置的绿色盘（传感器盘）上，然后将绿色盘插入到蓝色盘上，传感器预湿 10 分钟以上。

然后将传感器盘（凹面朝内）和样品板（A1 位置右上角）放入仪器中，关好仪器门。

2、打开程序

仪器门关闭后，打开仪器电源，在桌面上点击打开软件，设备完成自检后，左下角显示ready 方可进行后续操作。在 wizard 中点击“New Kinetics Experiment---Basic Kinetics”，

3、样品板设定

在plate definition 中根据样品的实际加样位置设置样品板，选中某列后右击依次设定：

Buffer：缓冲液

Load：固化物

Buffer：缓冲液

Sample：分析物

右边的table 中输入样品的信息（sample ID）以及浓度，sample 必须输入摩尔浓度。

4、步骤设定

在assay definition 中右侧上方点击 add，依次添加相应步骤，如：

Baseline，60s

Loading，300s

Baseline2，180s

Association，180s

Dissociation，300s

在step Data List 点击该步骤即可，然后双击样品板的某一列，将该步骤添加到该列检测。依次设置完毕。

5、传感器位置设定：

在sensor assignment 中选择传感器位置。比如传感器在第四列，则把第 1 列到第 3 列选中，按 remove(或者右击remove)即可。此时如果要选中第二列，则点击 fill。

6、检查步骤设置：

在review experiment 里面，点击箭头，浏览整个实验。如果发现有错误，回到前面进行修改。

7、运行设置：

在Run experiment 设置

保存路径：

实验名称：

实验延迟：如果传感器已经预湿10 分钟以上，则无需这个步骤。

其他为默认选项，无需修改。温度默认30度，不建议修改。

设置完毕后，实验开始（点击前必须保证仪器门关闭）。

三、仪器注意事项

1、**传感器保护**：

- 使用前室温平衡15分钟，避免骤冷骤热；

- 勿触碰探针尖端，用后立即浸入缓冲液防干燥。

2、**样品与缓冲液**：

- 样品需离心（≥10,000×g）去除沉淀；

- 缓冲液盐浓度≥150 mM（如PBS），避免低离子强度导致数据漂移。

3、**运行环境**：

- 避光操作，远离振动源；

- 板孔液面高度≥180 μL，确保探针浸没。

4、**数据可靠性**：

- 每板设置参比孔校正基线；

- 再生液（如10 mM Gly-HCl pH 1.7）使用≤3次即更换。