一、仪器基本信息

仪器型号：Morris

生产厂家：Noldus

购置时间：2017.10

所属技术服务部：行为学实验技术服务部

放置位置：动物楼304室

管理人员：旷策嫣 1837972320

仪器应用：评估空间学习记忆能力（尤其是海马依赖的记忆）。可以用于阿尔茨海默病模型验证、促认知药物筛选。

二、仪器操作流程

1、实验前准备：

1）水池：圆形水池（直径 120-180cm，高度 50-60cm），按象限分为 4 个区域（目标象限、对侧象限、相邻象限），内壁贴不同颜色 / 形状的视觉线索（固定位置，供动物定位）。

2）平台：材质为白色或透明塑料，直径 6-10cm（小鼠）或 10-15cm（大鼠）。高度略低于水深（隐蔽平台，测试空间记忆）；或高于水面（可见平台，测试非空间记忆，可选）。

3）水：加入奶粉 / 钛白粉使水浑浊（遮蔽平台），水温控制在 22-25℃（避免动物体温过低或应激），提前 1 天准备并恒温。

4）动物：实验前 1-3 天适应实验室环境，记录体重、健康状态（排除伤病、精神萎靡个体）。

2、训练阶段（通常 5-6 天）

1）每日训练：每只动物每天训练 4 次（间隔 15-30 分钟），每次从不同象限入水点放入水池（随机选择 4 个入水点，避免固定顺序）。

2）记录指标：逃避潜伏期（从入水到爬上平台的时间）、路径长度、游泳速度；若动物 60-120 秒内未找到平台，需引导至平台并停留 10-30 秒（帮助记忆）。

3）训练结束后：将动物擦干，放回饲养笼，恢复 10-15 分钟（避免受凉）。

3、探针测试（训练结束后 24 小时）

1）移除平台，将动物从目标象限对侧入水点放入，记录 60 秒内的行为：目标象限停留时间占比、穿越原平台位置次数、路径分布。

2）数据记录：通过视频跟踪系统自动记录，人工核对异常数据（如动物漂浮、沿壁游动）。

4、电脑操作步骤

1）启动软件与新建实验：打开 EthoVision 软件，点击 “file” 菜单中的 “new experiment”，为新建的试验命名并选择保存位置。

2）设定试验跟踪方法和视频源：建议选择 “center - point detection” 作为跟踪方法。对于实时采集的数据设定为 “live tracking”，然后选择好相应的视频信号输入口。若需要存储录像文件，点击 “settings” 按钮，在 “source” 下拉菜单里面选择合适的选项。

3）设定实验列表和独立变量：点击 “setup” 菜单中的 “trial list”，再点击 “add trials” 按钮，输入实验动物的数量，可根据实验需求设置相关独立变量。

4）图像采集区域设定：点击 “setup” 中的 “arena settings”，进入图像抓取界面。点击 “grab” 按钮，根据水迷宫形状选择画图工具。点击 “zone group1”，用直线工具将圆均分为 4 个区域，再用圆形标记出平台。点击 “label zone” 按钮给各个区域命名，确保箭头指在相应区域内部。点击 “calibration” 按钮，之后点击尺子工具，选择水面所在位置画两条正交的线，线长等于动物活动平面的直径，最后点击 “Validate Arena Setting” 结束图像采集区域设定。

5）试验条件控制：点击 “setup” 中的 “trial control settings”，可根据实验情况增加时间控制条件、位置控制条件等。例如，设置动物在平台区域停留时间等条件，可添加 “condition/In zone (2)”，选择 “When center - point is in platform Duration>=4.00s” 等。

6）检测参数的设定：点击 “setup” 中的 “detection settings”，将一只动物放入水迷宫，若软件能识别，动物会被黄色区域覆盖，中点会有红色点，运动轨迹会有红色线。若未出现，需调节动物与背景对比度数值等设置选项。一般大动物采样频率设置为 5，小动物设置为 8，调整好后点击 “ok” 按钮。

7）完成上述设置后，即可准备开始采集数据，点击 “show independent variables” 按钮输入实验动物编号，点击记录按钮，同时将动物放入水迷宫，软件会自动记录相关数据。

具体设置步骤可参考操作视频教程，视频教程可咨询平台负责人，

三、仪器注意事项

1、环境控制：水池视觉线索固定（位置、颜色、形状不变）；实验期间保持安静，实验者位置固定（避免自身成为线索）；每天同一时段测试（排除昼夜节律影响）。

2、动物状态：训练后及时擦干保暖（尤其小鼠，易受凉）；若动物连续 3 天逃避潜伏期无下降（无学习趋势），需排除健康问题；体重差异控制在 ±10% 内。

3、操作细节：水每周更换 1 次，每次训练后清理水面粪便；平台位置隐蔽（无气泡、倒影等线索）；探针测试时入水点固定（通常为目标象限对侧）。