一、仪器基本信息

仪器型号：37370

生产厂家：UGO

购置时间：2017.09

所属技术服务部：行为学实验技术服务部

放置位置：动物楼303室

管理人员：旷策嫣 1837972320

仪器应用：评估动物（如大鼠、小鼠等）对机械刺激引发疼痛反应。可用于疼痛模型研究、毒理学与安全性评价、药物研发与药效评估、基础神经科学研究。

二、仪器操作流程

1. 实验前准备

1）设备检查：确认 Von Frey filaments（尼龙单丝）完整无弯折，末端光滑（避免划伤动物皮肤），按直径 / 强度（如 0.008g-150g）依次排列。

2）准备透明观察箱（底部为金属网格或硬质平面），确保动物在箱内可自由活动且不受外界干扰。

3）环境适应：

将动物放入观察箱，在安静、避光环境中适应15-30 分钟，直至动物停止探索、保持静止（如蜷缩或缓慢移动）。适应期间避免触碰箱体或制造噪音。

2. 机械痛阈值测定（up-down 法）

1）刺激部位选择：

大鼠/ 小鼠通常选择后爪足底（避开脚垫厚实区域）或腹部皮肤；若评估神经损伤模型，需固定刺激同侧 / 对侧区域（如坐骨神经支配区）。

2）刺激操作：

用镊子夹持选定强度的单丝，垂直于皮肤表面轻压，使单丝弯曲并保持1-2 秒后撤离，观察动物是否出现缩爪、甩爪、舔爪等痛觉反应。

若无反应，30 秒后换用强度更高的单丝；若有反应，30 秒后换用强度更低的单丝。

重复上述步骤，直至出现连续2 次 “有反应” 或 “无反应”，记录最后 6 次刺激的强度及反应结果，用于计算痛阈值（按 Dixon 公式计算）。

3）重复测量：

每只动物同一部位测定3 次，每次间隔 5 分钟，取平均值作为最终痛阈值；若单次测量中动物持续活动（无法稳定接受刺激），需重新适应后再测。

3. 实验后处理

移除动物，清洁观察箱（用75% 酒精擦拭，去除气味残留），整理单丝并放回原包装盒（避免受压变形）。

三、仪器注意事项（或相关管理规定）

1. 设备与环境控制

1）单丝维护：

单丝为精密耗材，避免反复弯折或接触油污，使用后用无尘布擦拭；若末端磨损或弯曲，需及时更换（否则会导致刺激强度不准）。

定期用校准仪验证单丝强度（尤其是高频使用的中间强度单丝，如2g、4g）。

2）环境稳定性：

实验需在恒温（22-25℃）、隔音环境中进行，避免温度波动（低温可能导致痛阈值升高）或外界噪音干扰动物反应。

观察箱底部需平整，金属网格型号需匹配动物体型（如小鼠用1cm×1cm 网格，防止足爪卡入）。

2. 动物操作规范

1）减少应激：

抓取动物时动作轻柔，避免过度约束；若动物挣扎剧烈，需放回笼中平静5 分钟后再进行实验。

同一批次动物需在相同时间点测试（如均在上午9-11 点），避免昼夜节律对痛觉的影响。

2）刺激一致性：

单丝与皮肤接触角度必须垂直（倾斜会导致实际刺激强度降低），按压力度以单丝轻微弯曲为宜（过度弯曲可能造成额外机械损伤）。

避免在动物站立或移动时刺激，需等待其足爪自然接触底部时再进行操作。

3. 数据记录与分析

1）详细记录：

除痛阈值外，需记录动物反应类型（如缩爪速度、是否伴随舔舐）、刺激部位是否有损伤（如炎症、溃疡），这些信息可能影响结果解读。

若某只动物连续3 次测量数据差异超过 30%，需排除该数据或重新测试。

2）避免主观偏差：

建议由同一实验者完成所有测量，或采用双盲法（实验者不知动物分组），减少对“有 / 无反应” 判断的主观影响。