一、仪器基本信息

仪器型号：37450

生产厂家：UGO

购置时间：2017.09

所属技术服务部：行为学实验技术服务部

放置位置：动物楼303室

管理人员：旷策嫣 1837972320

仪器应用：通过定量辐射热刺激评估动物痛觉反应。可用于疼痛模型构建与评估、毒理学与环境应激研究、药物研发与药效评价、基础痛觉机制研究。

二、仪器操作流程

1. 实验前准备

1）设备检查与调试：

检查仪器电源线、红外发射器、计时器连接正常，开机预热10-15 分钟（确保红外强度稳定）。

2）校准设备：用辐射热功率计检测红外输出强度（通常设置为 50-70% 功率，具体按动物种属调整，如小鼠常用 60%，大鼠可略低），并设置最大安全时间（如 20 秒，避免长时间刺激导致皮肤灼伤）。

3）准备透明观察箱（底部为玻璃或塑料板，便于红外穿透），箱内铺垫网格板（防止动物站立不稳），确保动物在箱内可自由活动且刺激区域无遮挡。

4）动物适应：

将动物放入观察箱，在安静、室温（22-25℃）环境中适应 15-30 分钟，直至动物停止频繁活动（可静卧或缓慢移动）。适应期间避免触碰箱体或遮挡红外发射器。

2. 热痛阈值测定

1）刺激部位定位：

小鼠/ 大鼠通常选择后爪足底中部（避开脚垫和爪缘），确保红外光束垂直聚焦于该区域（可通过仪器自带的瞄准激光辅助定位）。

3、正式测试：

1）启动仪器，红外发射器对准目标部位，触发计时器，同时释放红外辐射热。

2）密切观察动物反应：当动物出现缩爪、抬爪或舔爪动作时，立即手动停止计时器（或仪器自动感应停止），记录反应潜伏期（PWL）。

3）若动物在最大安全时间内未出现反应，需强制停止刺激（避免灼伤），记录为最大时间值（如 20 秒）。

4）重复测量：

每只动物同一后爪测量3 次，每次间隔 5-10 分钟（避免皮肤温度累积升高影响结果），取平均值作为最终阈值。若动物在测量中频繁移动导致刺激部位偏离，需重新定位后再测。

3. 实验后处理

1）移除动物，关闭仪器电源，清洁观察箱（用 75% 酒精擦拭底部，去除粪便和气味残留）。

2）记录实验数据，包括动物编号、刺激部位、每次潜伏期及平均值，标注是否出现异常反应（如灼伤、无反应等）。

三、仪器注意事项（或相关管理规定）

1. 设备与环境控制

1）红外强度校准：

2）实验前可校准 1 次红外输出功率（用标准热传感器检测），确保不同实验日的刺激强度一致（功率偏差会直接导致阈值波动）。

3）避免仪器靠近热源（如暖气、白炽灯）或阳光直射，防止环境温度干扰红外辐射的稳定性。

2. 安全防护：

1）实验者需避免直视红外发射器（可能损伤视网膜），必要时佩戴护目镜；仪器运行时禁止将手或其他物体置于红外光束路径上。

2）严格遵守最大安全时间设置（小鼠通常≤20 秒，大鼠≤25 秒），每次测试后检查动物皮肤是否有红斑或灼伤，若出现损伤需暂停实验并记录。

3. 动物操作规范

1）减少应激干扰：

抓取动物时动作轻柔，避免过度约束导致动物紧张（应激可能使痛阈值升高）；若动物在观察箱内持续躁动（如频繁站立、攀爬），需延长适应时间（额外10-15 分钟）。

同一批次动物需在相同时间点测试（如均在上午8-12 点），排除昼夜节律对热痛觉的影响（啮齿类动物夜间痛觉敏感性可能更高）。

2）刺激一致性：

每次测量时，红外光束的聚焦点需固定在同一区域（误差≤1mm），避免因部位偏移导致的阈值差异（如足底边缘较中部对热刺激更敏感）。

观察箱底部需保持清洁透明，若有粪便或碎屑覆盖刺激区域，需及时清理（否则会吸收红外热量，降低实际刺激强度）。

4. 数据可靠性保障

1）排除异常值：

若某只动物的3 次测量值差异超过 50%（如第一次 8 秒，第三次 20 秒），需重新适应后复测；若仍不稳定，应排除该数据（可能因动物状态异常导致）。

若动物在测试中出现舔舐非刺激部位、排便等非特异性反应，不作为痛觉反应记录。

2）实验者盲法：

建议实验者不知晓动物分组（如正常组vs 模型组），减少对 “反应判断” 的主观偏差（如对模型动物可能更早判定反应）。

5. 特殊注意事项（针对不同模型）

1）炎症模型：若动物足底存在红肿，需降低红外功率（避免加重损伤），并缩短最大安全时间（如 15 秒）。

2）神经损伤模型：部分动物可能出现痛觉过敏（阈值降低）或痛觉迟钝（阈值升高），需根据预实验结果调整红外强度范围（如过敏模型可降低初始功率，避免反应过快难以记录）。